液相色谱仪是利用不同待分离物质在两相中的亲和力差异,如分配系数、吸附容量等。利用外力,含有样品的流动相(气体、液体)通过固定在柱或平板上的固定相表面,该固定相与流动不相溶。当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的组分与固定相相互作用。
为了保证液相色谱仪使用的稳定性,我们对于设备使用环境是有一定要求的,包括:通风、照明、供电、环境温度和湿度以及洁净度,其中:
1、通风:使用液相色谱仪分析过程中,由于流动相中含有挥发性有机溶剂(甲醇、乙睛等)会产生有害气体,对仪器中的光学元件带来腐蚀,应注意仪器室的通风,以排除室内有害气体、保持空气清新。通风主要有两种方式:一种自然通风,定时打开门窗,让内外空气对流;另一种是强制通风,如用通风柜、排风扇等,及时将有害气体排出室外。
2、照明:室内照明要光线适中,避免阳光直射。为避开直射光线对仪器操作、观测的影响,仪器(显示屏)应侧向光线。实验室窗户要挂窗帘,以便随时调节光照强度。
3、供电:液相色谱室应设有照明电源和动力电源,动力电可供仪器运行使用。为减少噪音的干扰,且仪器应远离瞬时供电的大功率电器设备,如大型电动设备、电梯、空调系统等。为保证HPLC输液泵的精度,必须要保证稳定的输人电压,为此,建议色谱室应设有和仪器负荷相当的稳压电源。
4、环境温度和湿度:适宜的温度和湿度是保障HPLC仪正常运行、性能稳定的必要条件。一般要求室温在20一30℃之间,日温度变化2一3℃,不要波动太大,否则,在开机分析时会影响色谱分离,夏季一定要控制室温不要超过30℃,温度太高会使流路系统产生气泡,影响检测器的正常工作(如荧光检测器)。室内相对湿度应控制在60%以下。
5、洁净度:悬浮于空气中的颗粒物质会对色谱仪器分析带来干扰,使本底和噪声升高,成为分析测试的污染源,直接影响高纯物质的纯度与痕量杂质的分析。