HPLC液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱及液-固色谱。由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与液相柱色谱装置比较,具有GX、快速、灵敏等特点。为了保证新手也能较好地使用HPLC液相色谱仪,新手需要对其核心使用技巧有一定的了解,下面我们来具体说说。
1.过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。
2.对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3.打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。
4.进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。
5.有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manua1菜单下,先点击purge, 再点击start,冲洗时速度不要超过10 ml/min。
6.调节流璽,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,-般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。
7.设计走样方法。点击file;选取select users and methods, 可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击new method。 选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括: a.进样前的稳流,- 般2-5分钟; b.基线归零; c. 进样阀的loading - inject转换; d. 走样时间,随不同的样品而不同。
8.进样和进样后操作。选定走样方法,点击starto 进样,**的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走-段基线,洗掉剩余物。
9.关机时,先关计算机,再关液相色谱。
10.填写登记本,由负责人签字。
以上就是HPLC液相色谱仪的核心使用技巧,希望能帮助大家更好地使用它。